Для лабораторной диагностики вирусных заболеваний могут быть использованы как методы обнаружения вируса или внутриклеточных включений, выделения и идентификации возбудителя, так и различные серологические методы исследования. Путем заражения культуры ткани куриного эмбриона или лабораторного животного при некоторых вирусных заболеваниях возможно выделение и идентификация возбудителя. Однако эти исследования представляют значительные трудности, что ограничивает их практическое использование.

Наибольшее практическое значение для диагностики вирусных заболеваний имеют серологические методы исследования.

Реакциями иммунитета (реакция связывания комплемента, реакция биологической нейтрализации, реакция торможения гемагглютинации и др.) пользуются как для идентификации вирусов при помощи диагностических иммунных сывороток, так и для постановки серологического диагноза.

Реакция биологической нейтрализации может быть использована как для определения вида вируса, так и для обнаружения вируснейтрализующих антител в исследуемых сыворотках больных или переболевших. При постановке этой реакции смесью вируса и соответствующей сыворотки, выдержанной в термостате в течение 1—2 ч, заражают культуру ткани, куриный эмбрион или она вводится в организм восприимчивого экспериментального животного. При положительной реакции какие-либо патологические изменения должны отсутствовать.

Реакция торможения гемагглютинации заключается в следующем: к различным разведениям исследуемой сыворотки в объеме 0,25 мл добавляют равный объем суспензии вируса, содержащей 4 гемагглютинирующих единицы вируса (4 АЕ). 1 АЕ — наибольшее разведение вируса, вызывающее полную агглютинацию эритроцитов. После встряхивания в каждую пробирку добавляют взвесь эритроцитов. Контрольная пробирка содержит вирус и эритроциты. При нейтрализации вируса иммунной сывороткой агглютинации эритроцитов не происходит. В контроле реакция гемагглютинации должна быть положительной. Реакция торможения гемагглютинации позволяет не только обнаруживать вирус в исследуемом материале или антитела в сыворотке, но и определять их типовую принадлежность (например, при гриппе).

Реакция преципитации последнее время широко применяется в вирусологической практике, в связи с высокой чувствительностью и быстротой получения результатов (от 4—6 до 18—20 ч).

В вирусологической практике наиболее широко используется реакция преципитации в геле на предметном стекле. Этот метод заключается в следующем: обезжиренное стекло заливают расплавленным агаром. После застывания агара в нем вырезают луночки на расстоянии 5—6 мм с помощью специального перфоратора. В лунки закапывают антиген и антитело. Стекла помещают во влажную камеру или чашку Петри с кусочком ваты, смоченной водой. Диффундируя в гель специфические компоненты на месте встречи дают линии преципитации. При несоответствии антигена антителу — линии преципитации не образуются.

При вирусных инфекциях для постановки серологического диагноза, как правило, исследуют «парные» сыворотки, т. е. сыворотки взятые в разное время у одного и того же больного. При положительной реакции нарастание титра должно быть не менее чем в четыре раза.
 

Практические занятия медицинские биологические препараты для профилактики и лечения инфекционных заболеваний Занятие 1-е. Вакцины и анатоксины. Вопросы для обсуждения. 1. Искусственный иммунитет, активный и пассивный. 2. Препараты для создания искусственного активного иммунитета: вакцины и анатоксины. 3. Виды вакцин: живые, убитые и химические. 4. Способы приготовления вакцин. 5. Анатоксины нативные и очищенные, их получение и титрован... Читать далее...