Анатоксины

Для создания искусственного антитоксического иммунитета (дифтерия, столбняк и др.) пользуются обезвреженным токсином — анатоксином. Анатоксин представляет собой экзотоксин (фильтрат токсигенной культуры микроба), обезвреженный длительным (18—30 дней) воздействием формалина (0,3—0,4% раствор) при температуре 37—40°С. Анатоксин контролируют на стерильность, безвредность и иммуногенность. Активность анатоксина определяют по способности реагировать со специфической антитоксической сывороткой. Активность выражается в единицах связывания (ЕС — столбнячный анатоксин) и флоккулирующих единицах (О — дифтерийный анатоксин).

Флоккулирующие единицы определяют при помощи реакции флоккуляции, которая является одной из реакций иммунитета. В этой реакции в качестве антигена участвует анатоксин и антитела — антитоксическая сыворотка.

Механизм реакции флоккуляции аналогичен механизму реакции агглютинации и преципитации, однако эта реакция имеет то преимущество, что позволяет произвести количественное определение реагирующих компонентов. Начальная, или так называемая инициальная, флоккуляция происходит при строгом количественном соответствии антигена и антитела. Количество антигена (токсина или анатоксина), дающее в смеси с 1 МЕ (антитоксическая единица) сыворотки инициальную флоккуляцию, называют единицей флоккуляции — Lf. Титр анатоксина— это содержание Lf в 1 мл препарата.
 

Для иммунизации готовят очищенные сорбированные анатоксиныДля иммунизации готовят очищенные сорбированные анатоксины. При очистке анатоксинов из них удаляют балластные вещества (вещества питательной среды, на которой культивировался токсигенный микроб, продукты метаболизма и распада микробной клетки). Очищенные анатоксины выпускают в сорбированном виде. В качестве сорбентов обычно используют гель гидрата окиси алюминия. По внешнему виду очищенные сорбированные анатоксины представляют собой бесцветные мутные жидкости, при стоянии образующие белые легко разбивающиеся осадки. Сорбированные препараты перед употреблением следует тщательно взбалтывать.

На ампулах с анатоксином должна быть этикетка с указанием института, изготовившего препарат, название и количество препарата, номер серии, номер государственного котнроля и срок годности. Хранить анатоксины следует в сухом месте при температуре 2—10°С. Анатоксины выпускают сроком годности 1—3 года.

Признаки негодности: отсутствие стерильности, безвредности, низкий титр, изменение нормального цвета и внешнего вида, нарушение целости ампулы или подтекание флакона, отсутствие этикетки.

На практических занятиях студенты ставят титрование дифтерийного анатоксина методом флоккуляции. Для проведения этого исследования необходима стандартная дифтерийная антитоксическая сыворотка.

Антитоксическую сыворотку известного титра разливают по пробиркам в количестве 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 и т. д., после чего в каждую пробирку наливают по 2 мл анатоксина, жидкость перемешивают и штативы с пробирками помещают на водяную баню при температуре 40°С. Через 2—10 мин в одной из пробирок, в которой количество анатоксина строго соответствует количеству антитоксина, произойдет флоккуляция — появится опалесценция, переходящая в помутнение. Через несколько минут флоккуляция может появиться и в соседних пробирках, поэтому очень важно уловить инициальную (начальную) флоккуляцию. Зная титр антитоксической сыворотки, определяют содержание в анатоксине флоккулирующих единиц. Полученные результаты титрования анатоксина следует записать в виде табл.
 Реакция флоккуляции

Стерильность и безвредность анатоксина проверяется так же, как при контроле вакцины.
 


Практические занятия медицинские биологические препараты для профилактики и лечения инфекционных заболеваний

Занятие 1-е. Вакцины и анатоксины.

Вопросы для обсуждения. 1. Искусственный иммунитет, активный и пассивный. 2. Препараты для создания искусственного активного иммунитета: вакцины и анатоксины. 3. Виды вакцин: живые, убитые и химические. 4. Способы приготовления вакцин. 5. Анатоксины нативные и очищенные, их получение и титрован...


Практические занятия вирусы

Занятие 1-е. Методы вирусологических исследований.

Вопросы для обсуждения: 1. Особенности биологии вирусов. 2. Принципы классификации вирусов. 3. Вирион, его строение, размеры и химический состав. 4. Микроскопические методы изучения морфологии вирусов. 5. Методы культивирования вирусов на культурах клеток, куриных эмбрионах, лаб...


Препараты для профилактики и лечения вирусных заболеваний

Препараты для профилактики и лечения оспы. Оспенная вакцина сухая — Vaccinum variolae siccum является живой вакциной. В зависимости от субстрата, на котором культивируют вирус, различают дермальную (культивирование на коже животных), тканевую (культивирование в клеточных культурах) и яичную или ововакцину (культивирование на куриных эмбрионах).

Возбудители основных вирусных заболеваний

Возбудитель оспы. Возбудитель оспы является одним из самых крупных вирусов (200—350 нм). Этот вирус может быть обнаружен в оптическом микроскопе при применении специальных методов окраски (тельца Пашена).

При натуральной оспе в эпителиальных клетках обнаруживаются внутриклеточные включения — тельца Гуарниери.



Категория: Лабораторные занятия по микробиологии
Просмотров: 43 | Теги: искусственный антитоксический иммун, микробиология, Анатоксины, создание искусственного иммунитета | Рейтинг: 0.0/0