Нам придется здесь коснуться вопроса о резистентности эритроцитов по отношению к различным солевым растворам. Эритроциты человека остаются нерастворенными не только в физиологическом растворе поваренной соли (0,92%), но и в растворах с значительно меньшей концентрацией, причем не все эритроциты данной крови растворяются при одной и той же концентрации; например, при 0,4% может раствориться только часть эритроцитов, при 0,3% — другая часть, тогда как при 0,26% растворяются уже все эритроциты данной крови. Хотя вопросу о резистентности эритроцитов в настоящее время уделяется много внимания, однако чрезвычайно трудно ориентироваться в данных, которые приводят различные авторы. Главный недочет этих исследований заключается в отсутствии однородной методики. Имеется четыре основных способа определения резистентности эритроцитов.

1. Кровь дефибринируется, эритроциты отмываются физиологическим раствором, а затем прибавляются в определенном количестве в пробирки с различной концентрацией раствора поваренной соли, начиная с 0,2%. Пробирка, в которой все эритроциты растворены, обозначается как максимальная резистентность или же нижняя граница резистентности; та же пробирка, в которой совершенно не произошло гемолиза, — как минимальная резистентность или верхняя граница резистентности. Минимальная резистентность, когда слой солевого раствора остается совершенно бесцветным, учитывается значительно точнее, чем максимальная, где нужно определить, когда исчезает минимальный осадок из эритроцитов на дне пробирки. Колебания в норме довольно значительны: 0,46 — 0,50 (минимальная), 0,22 — 0,30 (максимальная).

Шириной резистентности считается разница между минимальной и максимальной резистентностью. Указанные для нормы цифры, однако, резко отличаются у различных авторов.

2. Кровь дефибринируется и центрифугируется; определение производится с неотмытыми эритроцитами.

3. К растворам поваренной соли различной концентрации прибавляется цельная кровь.

4. Разведение крови гипотоническими растворами производится в смесителях, и микроскопически определяется количество оставшихся не-растворенными эритроцитов.

Из методики определения резистентности эритроцитов следует, что в одних случаях определяется резистентность отмытых эритроцитов, в других же к гипотоническому раствору прибавляются эритроциты с сывороткой или с плазмой крови. Чрезвычайно трудно расчленить, поскольку в исследуемом случае изменена резистентность самих эритроцитов или ж е на изменение резистентности эритроцитов подействовала окружающая их среда, т. е. плазма крови. Для понимания патологии процесса, конечно, это имеет существенное значение.

Микроскопический метод Яновского — видоизмененный способ Ченеля (Chanel). Существует много микроскопических методов для определения резистентности эритроцитов по отношению к гипотоническим растворам NaCl. После того как определяется количество эритроцитов в 1 см³, в том же меланжере делается разведение крови 0,4% раствором поваренной соли (1: 200) и через 10 минут снова подсчитывается в камере Тома-Цейсса, насколько уменьшилось количество эритроцитов; то же проделывается с 0,35 и 0,3% растворами.

Зиммель (Simmel) присоединил к методу фракционированного гемолиза Ченеля определение резистентности отдельных видов эритроцитов — старых и молодых. Разводя кровь (1: 100) различными гипотоническими растворами поваренной соли, он смазывает покровное стеклышко счетной камеры обычным способом брилланткрезильблау. При этом он высчитывает, насколько уменьшилось количество витальнозернистых (молодых) эритроцитов и насколько уменьшилось количество старых эритроцитов.

Выводы:

1. Молодые эритроциты в среднем более резистентны, нежели старые; однако этого нельзя сказать о каждом молодом эритроците в отдельности.

2. Повышение резистентности эритроцитов при вторичной анемии основано не только на повышенном попадании в кровь молодых эритроцитов.

3. При хлорозе молодые эритроциты резко отличаются своей неодинаковой резистентностью.

4. При гемолитической анемии понижение резистентности эритроцитов зависит в первую очередь от функции костного мозга.

Вместо обычного физиологического раствора поваренной соли Зиммель пользуется следующим раствором: 8,2 г NaCl, 0,2 г КСl, 0,2 г MgCl₂, 0,2 г СаСl₂, 0,1 г NaH₂PО₄, 0,05 г NaHCО₃ на литр воды. Этот раствор принимается за основной, и из него делаются дальнейшие разведения — 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3. Кровь набирается и разводится в меланжере для счета эритроцитов.    

Макроскопический метод определения резистентности эритроцитов. Техника такова. В пробирки разливается 1 см³ гипотонического раствора поваренной соли (0,7; 0,6; 0,5; 0,45; 0,42; 0,40; 0,38; 0,36; 0,34; 0,32; 0,30 и так далее до 0,2). Заранее приготовляется батарея бутылок с точными растворами. К каждой пробирке прибавляется 1 капля испытуемой крови. Одни авторы работают с цельной кровью, другие отмывают эритроциты от плазмы, считаясь с установленным фактом, что плазма крови несколько предохраняет эритроциты от гемолиза. Поэтому сравнивать можно только однородные способы исследования.

Кровь берется из вены сухим шприцем, а затем поступают различно:

1) или кровь сливается в колбочку, а оттуда пипеткой добавляется по капле в приготовленные пробирки с гипотоническими растворами;

2) или же кровь сливается в колбочку со стеклянными бусами, дефибринируется, центрифугируется, сыворотка удаляется, а эритроциты каплями распределяются по пробиркам, и, наконец; 

3) кровь дефибринируется, эритроциты отмываются физиологическим раствором, и после этого обычным способом производится определение резистентности. Результат исследования отмечается через 3 — 6 часов; обычно и на следующий день гемолиз не увеличивается (оставить в леднике). Каждый метод дает, конечно, свои цифры для нормы резистентности. Так, ширина резистентности может быть 0,45 (минимум) — 0,28 (максимум), 0,4 — 0,3 и т. д.
 

Практические занятия медицинские биологические препараты для профилактики и лечения инфекционных заболеваний Занятие 1-е. Вакцины и анатоксины. Вопросы для обсуждения. 1. Искусственный иммунитет, активный и пассивный. 2. Препараты для создания искусственного активного иммунитета: вакцины и анатоксины. 3. Виды вакцин: живые, убитые и химические. 4. Способы приготовления вакцин. 5. Анатоксины нативные и очищенные, их получение и титрован... Читать далее...